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微生物侵入試驗(yàn)如何操作

更新時(shí)間:2021-04-26   點(diǎn)擊次數(shù):1795次

    微生物侵入法,又稱(chēng)微生物挑戰(zhàn)法,是一種較為常見(jiàn)的密封完整性測(cè)試方法,通常與模擬灌裝同時(shí)進(jìn)行。通過(guò)按照模擬灌裝驗(yàn)證方案進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝,然后進(jìn)行壓塞軋蓋后,目檢合格,經(jīng)已驗(yàn)證的滅菌柜滅菌后,將容器密封面浸入到高濃度的菌液中,使樣品容器內(nèi)的培養(yǎng)基充分接觸封口內(nèi)表面,樣品的頸部及封口的外表面應(yīng)*浸泡在菌懸液中,浸泡一定時(shí)間后取出,定期培養(yǎng)后檢查是否有微生物侵入,以確定容器密封系統(tǒng)的完整性。同時(shí),需要做陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn),確認(rèn)培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)能力。  

一、 試驗(yàn)方法

將新鮮的銅綠假單胞菌(Pswudomonas aeruginosa)ATCC9027的菌懸液倒入不銹鋼桶中。

1將50個(gè)經(jīng)滅菌的試樣編號(hào),*侵入菌懸液中,同時(shí)將袋平放,使袋內(nèi)的無(wú)菌培養(yǎng)基充分接觸焊接部位的內(nèi)表面,試樣容器在菌懸液中持續(xù)浸泡4小時(shí)。

2浸泡結(jié)束時(shí)再取一份菌懸液,用平板計(jì)數(shù)菌懸液的濃度。

3從菌懸液中取出試樣,擦干試樣容器外殘余的菌懸液,然后用含0.5%過(guò)乙酸的70%異丙醇消毒容器外表面。

4取裝滿(mǎn)培養(yǎng)基樣品兩個(gè),作陽(yáng)性對(duì)照,其外表用含0.5%過(guò)乙酸的70%異丙醇消毒,接種入10~100CFU銅綠假單胞菌,按步驟8.2進(jìn)行培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)試驗(yàn)。

5將挑戰(zhàn)試驗(yàn)用的試樣培養(yǎng)7天,觀(guān)察檢查試樣容器內(nèi)培養(yǎng)基中微生物的生長(zhǎng)情況。有生長(zhǎng)記作+,無(wú)生長(zhǎng)記作-。如果試樣容器長(zhǎng)菌,按8.2方法確認(rèn)生長(zhǎng)菌是挑戰(zhàn)微生物——銅綠假單胞菌;如果所有試樣容器都不長(zhǎng)菌,則取10個(gè)試樣按8.2進(jìn)行培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)性試驗(yàn)。
6試驗(yàn)結(jié)束后,挑戰(zhàn)試驗(yàn)用菌懸液經(jīng)121℃30分鐘滅菌后丟棄。

二、判斷標(biāo)準(zhǔn)

1步驟2、步驟4、5中進(jìn)行的營(yíng)養(yǎng)性試驗(yàn)都合格,試樣的挑戰(zhàn)試驗(yàn)才有效。

2在挑戰(zhàn)試驗(yàn)開(kāi)始時(shí),挑戰(zhàn)用菌懸液濃度(活菌數(shù))必須達(dá)到1×106CFU/ml。

3挑戰(zhàn)試驗(yàn)中如長(zhǎng)菌,需記錄長(zhǎng)菌的試樣數(shù),并按下述要求作進(jìn)一步調(diào)查。

4仔細(xì)檢查容器各部位封口處是否有缺損,造成微生物浸入。

5將觀(guān)察到試樣容器封口的缺陷,采用拍照詳細(xì)記錄。

6如果任何挑戰(zhàn)試驗(yàn)中長(zhǎng)菌的容器不是由于容器封口明顯的物理性缺損所致,試驗(yàn)作失敗論處。

     微生物侵入法密封完整性試驗(yàn)除了需要準(zhǔn)備菌液外,還需要借助試驗(yàn)設(shè)備來(lái)完成。濟(jì)南瑞萊鉑智能科技研發(fā)生產(chǎn)的微生物侵入密封性泄漏實(shí)驗(yàn)儀ZYY-08A就是一款適用于微生物侵入法密封完整性試驗(yàn)的檢測(cè)儀器,儀器操作簡(jiǎn)單方便,測(cè)試精度高。而且儀器自帶微型打印機(jī),可打印設(shè)備序號(hào)、樣品批號(hào)、實(shí)驗(yàn)人員、測(cè)試結(jié)果、檢測(cè)時(shí)間等完整試驗(yàn)信息。

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